機動車與非機動車的主要區別在以下幾個方面。

驅動方式不同，機動車主要靠發動機，像汽車、摩托車是靠內燃機或電動機驅動；非機動車主要靠人力或畜力，像自行車、三輪車依靠人的踩踏或拉拽。

行駛速度有別，機動車行駛速度一般快，非機動車相對慢，所以道路上要分道行駛。

車輛結構也不一樣，機動車車身結構復雜，有發動機、底盤、車身和電氣設備等；非機動車結構簡單，常見的就是車架、車輪、腳踏板。

道路交通規則對兩者也有不同要求，比如信號燈路口，機動車右轉彎在不妨礙他人時可通行，非機動車得遵守行人優先原則。

另外，含義和覆蓋范圍不同，機動車是動力裝置驅動或牽引，供人乘坐、運輸貨物等的輪式車輛；非機動車是人力或畜力驅動在道路行駛的車輛，還有符合標準的動力裝置驅動的車輛，像殘疾人機動輪椅車、電動自行車。

動力來源和設計上也有差異，機動車靠燃油或電力產生動力，像汽車動力強、速度快、設計復雜；非機動車靠人力驅動，注重輕便便攜，像自行車、三輪車。